May 16, 2018

Suhteellinen kvantitointi proteiineista spektrofotometristä (UV-menetelmä)

Jätä viesti

Suhteellinen kvantitointi proteiineista spektrofotometristä (UV-menetelmä)

Tämä menetelmä on testata proteiinia suoraan aallonpituudella 280 nm. Valitse Warburg-kaava, fotometri voi suoraan näyttää näytteen pitoisuuden tai valita sopivan muuntomenetelmän absorbanssiarvon muuntamiseksi näytekonsentraatioksi. Proteiinin määritysprosessi on hyvin yksinkertainen. Testaa aihio ensin ja testaa sitten proteiini suoraan. Koska puskurissa on joitain epäpuhtauksia, "tausta" -tieto 320 nm: ssä poistuu yleensä ja tämä toiminto on asetettu "ON". Samalla kuin testinukleiinihapolla A280: n absorbanssiarvon on oltava vähintään suurempi kuin 0,1 A ja optimaalinen lineaarinen alue on välillä 1,0 - 1,5. Kun Warburg-kaavaa käytettiin osoittamaan näytteen pitoisuus kokeessa, lukemisen todettiin "ajautuvan". Tämä on normaali ilmiö. Itse asiassa, kunhan A280: n absorbanssiarvon havainnointi ei ylitä 1%, tulos on erittäin vakaa. Syynä ajovirtaan on, että Warburgin kaavan absorbanssiarvo muunnetaan pitoisuudeksi ja kerrotaan tietyllä tekijällä. Niin kauan kuin absorbanssiarvon vähäinen muutos muuttuu, pitoisuus vahvistetaan ja tulos on erittäin epävakaa. Suorat proteiinin kvantifiointimenetelmät soveltuvat suhteellisen puhtaiden, suhteellisen yksikomponenttisten proteiinien testaamiseen. UV-suora kvantifiointi on nopeampi ja helpompi suorittaa kuin kolorimetria; kuitenkin se on altis röntgensäteitä aiheuttaville häiriöille, kuten DNA-häiriöille ja alhainen herkkyys vaatii runsaasti proteiinipitoisuuksia.

Yritys on erikoistunut spektrofotometrien myyntiin, tervetulleita asiakkaita, jotka tarvitsevat konsultointia ja ostoa, tarjoamme sinulle vilpitöntä palvelua ja laatutuotteita sekä alhaisempia hintoja.

Sähköposti: info@sumerlab.com

Web: sumerinstrument.com


Lähetä kysely