Autoklaavisterilointi käsittää kolme erillistä vaihetta:
Ilmanpoisto: Tässä alkuvaiheessa autoklaavi poistaa ilman kammiosta. Tyhjiöpumppu imee ilmaa ja luo matalapaineisen ympäristön. Tämä vaihe varmistaa, että höyry tunkeutuu tehokkaasti kaikkiin alueisiin ja saavuttaa kuorman asianmukaisen steriloinnin varmistamiseksi.
Sterilointi: Kun ilma on poistettu, lämpötila autoklaavin sisällä saavuttaa oikean tason. Paineen alaisena syntyvä kylläinen höyry tappaa bakteereja, viruksia ja muita mikro-organismeja. Tavallinen sterilointilämpötila on 121 astetta paineessa 1,1 kilogrammaa/neliösenttimetri (kg/cm²) (vastaa 15 naulaa/neliötuuma (lb/in²)). Autoklaavin kesto vaihtelee kuorman tilavuuden mukaan, mutta sen katsotaan yleensä olevan 15-20 minuuttia.
Jäähdytys/kuivaus: Steriloinnin jälkeen höyry vapautuu ja autoklaavi jäähtyy. Kun lämpötila on turvallinen, ovi avataan ja steriloidut tuotteet ovat käyttövalmiita.
Tehokas ilmanpoisto, esineiden oikea sijoittelu ja riittävä kuumennusaika ovat ratkaisevan tärkeitä onnistuneen autoklaavisteriloinnin kannalta.